生物物理学 · 03.10
光学顕微鏡の分解能限界
Limit of resolution of the light microscope
🧠 分解能は2点を別々に識別できる最小距離で、倍率ではなく回折と開口数 numerical aperture 開口数(numerical aperture) numerical aperture(開口数) で決まる。
分解能を決める回折
点物体は点像ではなくエアリーパターン Airy pattern エアリーパターン(Airy pattern) Airy pattern(エアリーパターン) として結像する。2つのエアリー円盤 Airy disk エアリー円盤(Airy disk) Airy disk(エアリー円盤) が重なりすぎると別の構造として分離できない。
flowchart TD
A["点物体から光が回折"]
B["<span class='jp-term jp-term-diagram' title='objective lens'>対物レンズ</span>が有限角度の<span class='jp-term jp-term-diagram' title='diffracted light'>回折光</span>を収集"]
C["<span class='jp-term jp-term-diagram' title='Airy pattern'>エアリーパターン</span>の分離可能性が分解能を決定"]
A --> B
B --> C
アッベ・レイリーの分解能
が小さいほど高分解能 high resolution, HR高分解能(high resolution, HR) high resolution, HR(高分解能)。は物体側媒質 object-side medium 物体側媒質(object-side medium) object-side medium(物体側媒質) の屈折率 refractive index屈折率(refractive index) refractive index(屈折率)、は対物レンズ objective lens 対物レンズ(objective lens) objective lens(対物レンズ) が集める光の半角。
倍率と分解能の区別
点像の広がりは開口での回折から生じるため、総倍率だけを上げても分解できる細部は増えない。
- 短い波長、高い屈折率 refractive index屈折率(refractive index) refractive index(屈折率)、大きい開口角では小さくなる。
- 油浸oil immersion 油浸(oil immersion)oil immersion(油浸) はを上げ、カバーガラスcover glass カバーガラス(cover glass)cover glass(カバーガラス) 境界での光損失も減らす。
- 倍率だけを増やしてもが変わらなければ空倍率 empty magnification 空倍率(empty magnification) empty magnification(空倍率) となる。
医学・測定への応用
通常の可視光顕微鏡の横方向分解能 lateral resolution 横方向分解能(lateral resolution) lateral resolution(横方向分解能) はおよそ200 nmで、細菌は見えても分子は直接分離できない。高開口数 numerical aperture 開口数(numerical aperture) numerical aperture(開口数) 照明による計算画像化や超振動レンズは、この回折制約 Limitations 制約(Limitations) Limitations(制約) を踏まえて分解能を高める方法である。12
まとめ
- 分解能は2点を別々に識別できる最小距離で、倍率ではなく回折と開口数 numerical aperture 開口数(numerical aperture) numerical aperture(開口数) で決まる。
- 短い波長、高い屈折率 refractive index屈折率(refractive index) refractive index(屈折率)、大きい開口角では小さくなる。
- 通常の可視光顕微鏡の横方向分解能 lateral resolution 横方向分解能(lateral resolution) lateral resolution(横方向分解能) はおよそ200 nmで、細菌は見えても分子は直接分離できない。
出典
- 1.Resolution-enhanced Fourier ptychographic microscopy based on high-numerical-aperture illuminations(Scientific Reports・2017)高開口数照明を利用する光学顕微鏡の分解能向上閲覧 2026-08-21
- 2.A super-oscillatory lens optical microscope for subwavelength imaging(Nature Materials・2012)回折限界を超える光学顕微鏡法の実証閲覧 2026-08-21