Histopathology · H1-055
肺結核（Ziehl-Neelsen染色）
Tuberculosis pulmonis (ZN)
- 描出疾患
- 結核
🧠 全体像：Ziehl-Neelsen染色Ziehl-Neelsen stainZiehl-Neelsen染色（Ziehl-Neelsen stain）Ziehl-Neelsen stain（Ziehl-Neelsen染色）では、ミコール酸mycolic acidミコール酸（mycolic acid）mycolic acid（ミコール酸）に富む細胞壁をもつ抗酸菌（acid-fast bacilli）が青い肺組織を背景に赤色の細い桿菌として残る。乾酪壊死性肉芽腫caseating necrotizing granuloma乾酪壊死性肉芽腫（caseating necrotizing granuloma）caseating necrotizing granuloma（乾酪壊死性肉芽腫）と赤い抗酸菌は肺結核を強く支持するが、肉芽granulation肉芽（granulation）granulation（肉芽）腫だけでも抗酸菌陽性だけでも結核菌群Mycobacterium tuberculosis complex結核菌群（Mycobacterium tuberculosis complex）Mycobacterium tuberculosis complex（結核菌群）の確定にはならない。
標本の要点
| 項目 | 所見 |
|---|---|
| 臓器 | 肺 |
| 染色 | Ziehl-Neelsen染色Ziehl-Neelsen stainZiehl-Neelsen染色（Ziehl-Neelsen stain）Ziehl-Neelsen stain（Ziehl-Neelsen染色） |
| 背景 | メチレンブルーmethylene blueメチレンブルー（methylene blue）methylene blue（メチレンブルー）で青く染まる肺組織・気管支上皮 |
| 病変 | 乾酪壊死性肉芽腫caseating necrotizing granuloma乾酪壊死性肉芽腫（caseating necrotizing granuloma）caseating necrotizing granuloma（乾酪壊死性肉芽腫） |
| 目的構造 | 青い背景内に散在する赤色の細い桿菌 |
| 解釈 | 抗酸菌陽性。結核菌群Mycobacterium tuberculosis complex結核菌群（Mycobacterium tuberculosis complex）Mycobacterium tuberculosis complex（結核菌群）の確定には核酸増幅検査nucleic acid amplification test, NAAT核酸増幅検査（nucleic acid amplification test, NAAT）nucleic acid amplification test, NAAT（核酸増幅検査）・培養が必要 |
染色原理
flowchart TD
A["<span class='jp-term jp-term-diagram' title='carbol fuchsin'>カルボールフクシン</span>を加温して浸透"] --> B["抗酸菌の<span class='jp-term jp-term-diagram' title='mycolic acid'>ミコール酸</span>に富む細胞壁へ保持"]
B --> C["<span class='jp-term jp-term-diagram' title='acid-alcohol'>酸アルコール</span>で脱色"]
C --> D["抗酸菌は赤色を保持"]
C --> E["背景組織は脱色"]
E --> F["<span class='jp-term jp-term-diagram' title='methylene blue'>メチレンブルー</span>で<span class='jp-term jp-term-diagram' title='counterstain'>対比染色</span>"]
F --> G["赤い桿菌と青い背景"]「抗酸性acid-fastness抗酸性（acid-fastness）acid-fastness（抗酸性）」は、酸アルコールacid-alcohol酸アルコール（acid-alcohol）acid-alcohol（酸アルコール）で処理してもカルボールフクシンcarbol fuchsinカルボールフクシン（carbol fuchsin）carbol fuchsin（カルボールフクシン）を保持する性質を指す。
観察の順序
- 低倍率で青く染まる肺胞・気管支上皮と、結節状の乾酪壊死性肉芽腫caseating necrotizing granuloma乾酪壊死性肉芽腫（caseating necrotizing granuloma）caseating necrotizing granuloma（乾酪壊死性肉芽腫）を確認する。
- 肉芽granulation肉芽（granulation）granulation（肉芽）腫の壊死部や細胞内を高倍率で系統的に走査scanning走査（scanning）scanning（走査）する。
- 青い背景に対して鮮明な赤色を示す、細くわずかに湾曲した桿菌を探す。
- 沈殿precipitation沈殿（precipitation）precipitation（沈殿）、染色むら、組織片の縁を桿菌と誤認しない。
| 観察対象 | 読み方 |
|---|---|
| 肺実質 | 青い肺胞隔壁と肺胞腔alveolar space肺胞腔（alveolar space）alveolar space（肺胞腔）が背景の向きを示す |
| 気管支上皮 | 青い対比染色counterstain対比染色（counterstain）counterstain（対比染色）で上皮構造を確認できる |
| 乾酪壊死性肉芽腫caseating necrotizing granuloma乾酪壊死性肉芽腫（caseating necrotizing granuloma）caseating necrotizing granuloma（乾酪壊死性肉芽腫） | 結核を示唆する宿主反応host reaction宿主反応（host reaction）host reaction（宿主反応）だが、菌の存在とは別に評価する |
| 赤色桿菌 | 抗酸菌に合致する直接所見 |
HE染色との役割分担
| 染色・検査 | 主にわかること | 限界 |
|---|---|---|
| HE染色 | 乾酪壊死caseous necrosis乾酪壊死（caseous necrosis）caseous necrosis（乾酪壊死）、類上皮細胞epithelioid cells類上皮細胞（epithelioid cells）epithelioid cells（類上皮細胞）、巨細胞、リンパ球、線維化 | 菌体を安定して同定できない |
| Ziehl-Neelsen染色Ziehl-Neelsen stainZiehl-Neelsen染色（Ziehl-Neelsen stain）Ziehl-Neelsen stain（Ziehl-Neelsen染色） | 組織内の抗酸菌 | 陽性でも結核菌Mycobacterium tuberculosis結核菌（Mycobacterium tuberculosis）Mycobacterium tuberculosis（結核菌）と非結核性抗酸菌nontuberculous mycobacteria, NTM非結核性抗酸菌（nontuberculous mycobacteria, NTM）nontuberculous mycobacteria, NTM（非結核性抗酸菌）を区別できない |
| 核酸増幅検査nucleic acid amplification test, NAAT核酸増幅検査（nucleic acid amplification test, NAAT）nucleic acid amplification test, NAAT（核酸増幅検査） | 結核菌群Mycobacterium tuberculosis complex結核菌群（Mycobacterium tuberculosis complex）Mycobacterium tuberculosis complex（結核菌群）を迅速に検出し、一部薬剤耐性antimicrobial resistance, AMR薬剤耐性（antimicrobial resistance, AMR）antimicrobial resistance, AMR（薬剤耐性）も評価 | 陰性でも病変量が少ない組織結核を完全には除外できない |
| 培養 | 菌種同定species-level identification菌種同定（species-level identification）species-level identification（菌種同定）と薬剤感受性 | 結果まで時間を要する |
⚠️ 乾酪壊死性肉芽腫caseating necrotizing granuloma乾酪壊死性肉芽腫（caseating necrotizing granuloma）caseating necrotizing granuloma（乾酪壊死性肉芽腫）は病原体確認ではない。また、抗酸菌染色acid-fast stain抗酸菌染色（acid-fast stain）acid-fast stain（抗酸菌染色）陽性は「抗酸菌が存在する」ことを示すが、形態だけでMycobacterium tuberculosisと断定しない。逆に染色陰性でも菌量の少ない結核を除外できない。
現在の結核診断では、臨床的に疑う場合、塗抹鏡検だけに依存せず、核酸増幅検査nucleic acid amplification test, NAAT核酸増幅検査（nucleic acid amplification test, NAAT）nucleic acid amplification test, NAAT（核酸増幅検査）を中心に培養・薬剤感受性検査drug susceptibility testing薬剤感受性検査（drug susceptibility testing）drug susceptibility testing（薬剤感受性検査）を組み合わせる。
乾酪壊死性肉芽腫caseating necrotizing granuloma乾酪壊死性肉芽腫（caseating necrotizing granuloma）caseating necrotizing granuloma（乾酪壊死性肉芽腫）の構築は H1-054：肺結核（HE染色） で確認する。
まとめ
- Ziehl-Neelsen染色Ziehl-Neelsen stainZiehl-Neelsen染色（Ziehl-Neelsen stain）Ziehl-Neelsen stain（Ziehl-Neelsen染色）では、抗酸菌は青い背景上の赤い細い桿菌として見える。
- 肺実質、気管支上皮、乾酪壊死性肉芽腫caseating necrotizing granuloma乾酪壊死性肉芽腫（caseating necrotizing granuloma）caseating necrotizing granuloma（乾酪壊死性肉芽腫）と、菌体の直接像を分けて観察する。
- 肉芽granulation肉芽（granulation）granulation（肉芽）腫は宿主反応host reaction宿主反応（host reaction）host reaction（宿主反応）、赤色桿菌は抗酸菌の直接所見であり、両者の意味は異なる。
- 結核菌群Mycobacterium tuberculosis complex結核菌群（Mycobacterium tuberculosis complex）Mycobacterium tuberculosis complex（結核菌群）の確定と薬剤耐性antimicrobial resistance, AMR薬剤耐性（antimicrobial resistance, AMR）antimicrobial resistance, AMR（薬剤耐性）評価には核酸増幅検査nucleic acid amplification test, NAAT核酸増幅検査（nucleic acid amplification test, NAAT）nucleic acid amplification test, NAAT（核酸増幅検査）・培養を組み合わせる。