pp65抗原血症法

🧠 全体像：pp65抗原血症法 pp65 antigenemia assay pp65抗原血症法（pp65 antigenemia assay） pp65 antigenemia assay（pp65抗原血症法） は、血中に感染細胞由来の蛋白を帯びた白血球がどれだけ回っているかを、数えて見る検査である。サイトメガロウイルスcytomegalovirus, CMV サイトメガロウイルス（cytomegalovirus, CMV）cytomegalovirus, CMV（サイトメガロウイルス） （CMVCMV, cytomegalovirus）の下部マトリックス蛋白 lower matrix phosphoprotein下部マトリックス蛋白（lower matrix phosphoprotein） lower matrix phosphoprotein（下部マトリックス蛋白）pp65を白血球ごと染色し、陽性細胞を数える。ウイルスの核酸そのものを増幅して検出する核酸増幅検査nucleic acid amplification test, NAAT 核酸増幅検査（nucleic acid amplification test, NAAT）nucleic acid amplification test, NAAT（核酸増幅検査） （NAATNAAT, nucleic acid amplification test）とは、測っている対象がそもそも違う——一方は蛋白を帯びた細胞の数、もう一方は核酸のコピー数 copy number コピー数（copy number） copy number（コピー数） である。

何を測っているか

末梢血の白血球（大部分は好中球）をスライド slide スライド（slide） slide（スライド） 上に固定し、pp65（UL83遺伝子産物UL83 gene productUL83遺伝子産物（UL83 gene product）UL83 gene product（UL83遺伝子産物））に対するモノクローナル抗体で染色したうえで、蛍光顕微鏡fluorescence microscope 蛍光顕微鏡（fluorescence microscope）fluorescence microscope（蛍光顕微鏡） 下で陽性に染まった細胞の数を数える。感染細胞から放出されたpp65は、感染していない好中球にも取り込まれて染まりうるため、陽性細胞のすべてが感染細胞そのものとは限らない——「感染巣locus of infection 感染巣（locus of infection）locus of infection（感染巣） から出た蛋白を拾った白血球の数」を見ている検査である。

結果は「陽性細胞数／検鏡した白血球数 white blood cell count白血球数（white blood cell count） white blood cell count（白血球数）」という分数の形で報告される（例：3/50,000）。単なる陽性・陰性の定性判定ではなく、陽性細胞数そのものが半定量的な指標として扱われる。

基準値と結果の表し方

• 検鏡する白血球の分母（5万個・10万個・15万個など）は施設ごとにまちまちで統一されていない
• 染色に使うモノクローナル抗体（C10/C11、HRP-C7など）も施設によって異なり、同じ検体でも検出感度に差が出る
• この2点のため、陽性細胞数という数値そのものを施設をまたいで比較することはできない。数値の推移が意味を持つのは、同一施設・同一プロトコルで経時的 serial 経時的（serial） serial（経時的） に追ったときに限られる

陽性の意味

CMV再活性化・CMV感染症の指標になる。臓器移植後・造血幹細胞移植hematopoietic stem cell transplantation, HSCT 造血幹細胞移植（hematopoietic stem cell transplantation, HSCT）hematopoietic stem cell transplantation, HSCT（造血幹細胞移植） 後や、HIVHIV（human immunodeficiency virus）感染が進行しCD4陽性細胞数 CD4-positive cell count CD4陽性細胞数（CD4-positive cell count） CD4-positive cell count（CD4陽性細胞数） が低下した患者など免疫不全の場面で、無症状のうちに再活性化を捉え、発症前に治療を始める——先制治療preemptive therapy先制治療（preemptive therapy）preemptive therapy（先制治療）——の開始基準として使われてきた。治療開始後は、陽性細胞数の低下が治療反応の指標になる。

先制治療preemptive therapy 先制治療（preemptive therapy）preemptive therapy（先制治療） は、リスクの高い患者にあらかじめ抗ウイルス薬を投与する予防投与と対になる戦略である。どちらを選ぶかは移植臓器の種類とドナー/レシピエントrecipient レシピエント（recipient）recipient（レシピエント） のCMV血清型の組み合わせで変わり、一律には決まらない。高リスク群（ドナー陽性・レシピエントrecipient レシピエント（recipient）recipient（レシピエント） 陰性）では予防投与が優先されることがある一方、それ以外の多くの患者では先制治療 preemptive therapy 先制治療（preemptive therapy） preemptive therapy（先制治療） も妥当な選択肢とされる¹。

⚠️ 測定上の注意

• 好中球減少例では偽陰性になりうる。 数える対象そのものが末梢血中に乏しければ、陽性細胞は検出しようがない²。好中球数が1,000/mm³を下回る状況は、この検査の解析上の限界の一つとされる³。造血幹細胞移植hematopoietic stem cell transplantation, HSCT 造血幹細胞移植（hematopoietic stem cell transplantation, HSCT）hematopoietic stem cell transplantation, HSCT（造血幹細胞移植） 後や、CMV治療薬である（バル）ガンシクロビル ganciclovir ガンシクロビル（ganciclovir） ganciclovir（ガンシクロビル） 自体が骨髄抑制を来すため、移植直後・治療中というこの検査が最も必要な場面で、まさに検査が成立しにくくなりうる
• 検体は速やかに処理する必要がある。 好中球は体外で変性し、時間が経つほどpp65の染色性が失われて偽陰性を招く。判定は顕微鏡下の目視によるため自動化しにくく、操作者依存operator-dependent 操作者依存（operator-dependent）operator-dependent（操作者依存） の半定量検査 semiquantitative test半定量検査（semiquantitative test） semiquantitative test（半定量検査）という性格を持つ³
• 血中陰性はCMV病を否定しない。 消化管・網膜など臓器局所のCMV病は、血流に陽性細胞がほとんど出ないまま進行しうる

定量PCRとの対比

経時変化とモニタリング

pp65抗原血症法pp65 antigenemia assay pp65抗原血症法（pp65 antigenemia assay）pp65 antigenemia assay（pp65抗原血症法） はかつてCMVモニタリングの主力だったが、現在は定量的核酸増幅検査nucleic acid amplification test, NAAT核酸増幅検査（nucleic acid amplification test, NAAT）nucleic acid amplification test, NAAT（核酸増幅検査）（定量PCRquantitative PCR定量PCR（quantitative PCR）quantitative PCR（定量PCR））への置き換えが進んでいる。転機になったのは標準化である。2010年にCMV核酸増幅検査 nucleic acid amplification test, NAAT 核酸増幅検査（nucleic acid amplification test, NAAT） nucleic acid amplification test, NAAT（核酸増幅検査） 用のWHO国際標準品（第1次）が確立され、これを基準に二次標準品 secondary standard 二次標準品（secondary standard） secondary standard（二次標準品） をIU/mLで校正 proofreading 校正（proofreading） proofreading（校正） できるようになったことで、異なる施設・異なるアッセイの結果を比較できるようになった⁴。これに対し抗原血症法は分母も抗体も施設ごとに異なる操作者依存 operator-dependent 操作者依存（operator-dependent） operator-dependent（操作者依存） の半定量検査 semiquantitative test 半定量検査（semiquantitative test） semiquantitative test（半定量検査） にとどまり、同じ土俵での標準化に乗れなかった³。

それでも抗原血症法が完全に消えたわけではない。定量PCRquantitative PCR 定量PCR（quantitative PCR）quantitative PCR（定量PCR） の設備を持たない施設、結果が出るまでの橋渡し、また好中球数が保たれている患者では、実績のある指標として今も使われる場面がある。かつてウイルス培養viral cultureウイルス培養（viral culture）viral culture（ウイルス培養）がCMVモニタリングの中心だった時代から、抗原血症法・定量PCRquantitative PCR 定量PCR（quantitative PCR）quantitative PCR（定量PCR） へと主役が移ってきた経緯も参照。

まとめ

• pp65抗原血症法pp65 antigenemia assay pp65抗原血症法（pp65 antigenemia assay）pp65 antigenemia assay（pp65抗原血症法） は、CMVのpp65蛋白を帯びた白血球を蛍光抗体で染めて数える検査で、核酸を増幅するNAATとは測る対象が異なる
• 結果は「陽性細胞数／検鏡白血球数 white blood cell count白血球数（white blood cell count） white blood cell count（白血球数）」で表され、分母・抗体が施設ごとに異なるため施設間で数値を比較できない
• 陽性はCMV再活性化・感染症の指標で、先制治療preemptive therapy 先制治療（preemptive therapy）preemptive therapy（先制治療） の開始判断や治療反応の評価に使われる。先制治療preemptive therapy 先制治療（preemptive therapy）preemptive therapy（先制治療） と予防投与のどちらを選ぶかは移植臓器と血清型の組み合わせで変わる
• ⚠️ 好中球減少で偽陰性になりうる、検体は数時間以内に処理が必要、血中陰性は臓器局所のCMV病を否定しない
• 2010年のWHO国際標準品を背景に定量PCR quantitative PCR 定量PCR（quantitative PCR） quantitative PCR（定量PCR） への置き換えが進んでいるが、好中球が保たれている患者やPCRPCR（polymerase chain reaction）非対応施設では今も使われる