Kleihauer-Betke試験

🧠 全体像：Kleihauer-Betke試験Kleihauer-Betke testKleihauer-Betke試験（Kleihauer-Betke test）Kleihauer-Betke test（Kleihauer-Betke試験）は、母体血中に混じった胎児赤血球fetal red blood cell胎児赤血球（fetal red blood cell）fetal red blood cell（胎児赤血球）の割合を酸溶出法で数える検査である。何かの疾患を診断する検査ではなく、すでに疑っている胎児母体間出血fetomaternal hemorrhage胎児母体間出血（fetomaternal hemorrhage）fetomaternal hemorrhage（胎児母体間出血）の量を推定するための検査であり、出血の有無そのものを検出する感度は高くない。主目的はRhD陰性未感作妊婦unsensitized RhD-negative pregnant womanRhD陰性未感作妊婦（unsensitized RhD-negative pregnant woman）unsensitized RhD-negative pregnant woman（RhD陰性未感作妊婦）における抗D免疫グロブリンanti-D immunoglobulin抗D免疫グロブリン（anti-D immunoglobulin）anti-D immunoglobulin（抗D免疫グロブリン）の追加投与量を決めることで、常位胎盤早期剥離placental abruption常位胎盤早期剥離（placental abruption）placental abruption（常位胎盤早期剥離）のような病態そのものの診断には使えない。

何を測っているか

母体末梢血の塗抹標本smear preparation塗抹標本（smear preparation）smear preparation（塗抹標本）を酸性緩衝液（pH 3.3）で処理すると、成人ヘモグロビンHbA成人ヘモグロビン（HbA）HbA（成人ヘモグロビン）は赤血球から酸に溶出し、その赤血球は染色されない「ゴースト細胞ghost cellゴースト細胞（ghost cell）ghost cell（ゴースト細胞）」として残る。一方、胎児ヘモグロビンfetal hemoglobin (HbF)胎児ヘモグロビン（fetal hemoglobin (HbF)）fetal hemoglobin (HbF)（胎児ヘモグロビン）（HbF）は酸抵抗性acid resistance酸抵抗性（acid resistance）acid resistance（酸抵抗性）のため溶出されず、胎児赤血球fetal red blood cell胎児赤血球（fetal red blood cell）fetal red blood cell（胎児赤血球）は淡い赤色に染色されて残る¹。

flowchart TD
    A["母体血塗抹を作成"] --> B["酸性緩衝液(pH 3.3)で処理"]
    B --> C["成人赤血球(HbA)は酸に溶出"]
    B --> D["<span class='jp-term jp-term-diagram' title='fetal red blood cell'>胎児赤血球</span>(HbF)は<span class='jp-term jp-term-diagram' title='acid resistance'>酸抵抗性</span>"]
    C --> E["無染色の<span class='jp-term jp-term-diagram' title='ghost cell'>ゴースト細胞</span>として残る"]
    D --> F["淡赤色に染色されて残る"]
    E --> G["顕微鏡で染色赤血球の割合を<span class='jp-term jp-term-diagram' title='counting'>計数</span>"]
    F --> G
    G --> H["<span class='jp-term jp-term-diagram' title='fetomaternal hemorrhage'>胎児母体間出血</span>量を推定"]

染色された赤血球の割合（%）が、母体循環maternal circulation母体循環（maternal circulation）maternal circulation（母体循環）に入った胎児赤血球fetal red blood cell胎児赤血球（fetal red blood cell）fetal red blood cell（胎児赤血球）の目安になる。ただしこの割合は染色濃度や観察者の判定に左右され、後述のように偽陽性・偽陰性の双方がありうる。

基準値と単位

結果は「正常・異常」の二分ではなく、全赤血球に占める胎児細胞の割合（%）として報告される¹。この割合を母体推定血液量へ換算した出血量（mL）が、抗D免疫グロブリンanti-D immunoglobulin抗D免疫グロブリン（anti-D immunoglobulin）anti-D immunoglobulin（抗D免疫グロブリン）の投与量を決める実務上の単位になる。割合が低い、あるいは検出されない場合でも、それ自体で胎児母体間出血fetomaternal hemorrhage胎児母体間出血（fetomaternal hemorrhage）fetomaternal hemorrhage（胎児母体間出血）を否定する検査ではない点は「⚠️ 測定上の注意」を参照する。

使う場面

胎児死亡、胎児貧血fetal anemia胎児貧血（fetal anemia）fetal anemia（胎児貧血）のスクリーニング、妊娠中の外傷、早産徴bloody show産徴（bloody show）bloody show（産徴）候の評価、外回転術external cephalic version, ECV外回転術（external cephalic version, ECV）external cephalic version, ECV（外回転術）後などが適応として挙げられる¹。実務上は次のような場面で検討される。

外回転術external cephalic version, ECV外回転術（external cephalic version, ECV）external cephalic version, ECV（外回転術）後は伝統的Traditional伝統的（Traditional）Traditional（伝統的）に胎児母体間出血fetomaternal hemorrhage胎児母体間出血（fetomaternal hemorrhage）fetomaternal hemorrhage（胎児母体間出血）の高リスク処置として本試験の適応に挙げられてきたが、合併症のない外回転external cephalic version外回転（external cephalic version）external cephalic version（外回転）後に重大な出血（30 mL超）を来す例は稀とする報告があり、全例への系統的な検査の要否は議論がある²。

高値の意味（抗D免疫グロブリンの追加投与量）

RhD陰性未感作妊婦unsensitized RhD-negative pregnant womanRhD陰性未感作妊婦（unsensitized RhD-negative pregnant woman）unsensitized RhD-negative pregnant woman（RhD陰性未感作妊婦）への標準投与量（300 µg）は、約30 mLの胎児全血（15 mLの胎児赤血球fetal red blood cell胎児赤血球（fetal red blood cell）fetal red blood cell（胎児赤血球））に相当する胎児母体間出血fetomaternal hemorrhage胎児母体間出血（fetomaternal hemorrhage）fetomaternal hemorrhage（胎児母体間出血）をカバーする。染色赤血球の割合からこれを超える出血が推定される場合は、追加投与量を計算する¹。

この計算はあくまで概算であり、施設のプロトコルと薬剤部・輸血部門での確認を経て投与量を確定する。

⚠️ 測定上の注意

• 常位胎盤早期剥離placental abruption常位胎盤早期剥離（placental abruption）placental abruption（常位胎盤早期剥離）の確定診断・除外には使えない。 本試験は既知の出血の量を推定する検査であり、出血の存在自体を検出するための検査ではない。特異度は高いが感度は低く、陽性となる閾値は約5 mLの胎児母体間出血fetomaternal hemorrhage胎児母体間出血（fetomaternal hemorrhage）fetomaternal hemorrhage（胎児母体間出血）とされる¹。常位胎盤早期剥離placental abruption常位胎盤早期剥離（placental abruption）placental abruption（常位胎盤早期剥離）は臨床診断であり、陰性の本試験だけで否定しない。
• 偽陽性。 母体側maternal part母体側（maternal part）maternal part（母体側）のHbF高値をきたす病態——遺伝性胎児Hb持続症、鎌状赤血球症、サラセミアThalassemiasサラセミア（Thalassemias）Thalassemias（サラセミア）など——があると、胎児赤血球fetal red blood cell胎児赤血球（fetal red blood cell）fetal red blood cell（胎児赤血球）がなくても染色赤血球が増え、出血量を過大評価する¹。妊娠自体も母体F細胞F cellF細胞（F cell）F cell（F細胞）を非妊娠時の約5倍まで生理的に増やし、妊娠18〜22週前後でピークを迎える。 この生理的増加だけでも出血量を過大評価しうるため、母体F細胞F cellF細胞（F cell）F cell（F細胞）高値が疑われる結果は基準検査機関でのフローサイトメトリーflow cytometryフローサイトメトリー（flow cytometry）flow cytometry（フローサイトメトリー）などによる確認が望ましい³。糖尿病、手術、貧血などのストレスも、これらの疾患がない妊婦での母体HbF一過性上昇の一因になる⁴。
• 用手法の観察者間差。 淡く染色された境界不明瞭な赤血球を胎児由来か成人由来か判定するのは難しく、観察者間の変動係数coefficient of variation変動係数（coefficient of variation）coefficient of variation（変動係数）は約20%に達しうる⁴。フローサイトメトリーflow cytometryフローサイトメトリー（flow cytometry）flow cytometry（フローサイトメトリー）（抗HbF抗体などを用いる）はより精密な基準法だが、コストと時間を要するため、用手法の結果が疑わしい症例や大量出血が疑われる症例に限って追加する運用が現実的である^{1 4}。
• 採血のタイミング。 抗D免疫グロブリンanti-D immunoglobulin抗D免疫グロブリン（anti-D immunoglobulin）anti-D immunoglobulin（抗D免疫グロブリン）の追加投与量を決める判断に間に合うよう、分娩後または疑わしいイベントの後はなるべく早く採血する。判断が遅れるほど、投与のタイミングそのものが遅れるリスクが上がる。

経時変化とモニタリング

• 出血が持続している、または初回検査で大量出血が疑われる場合は、時間を空けて再検査し、投与量の見直しが必要かを確認する。
• 抗D免疫グロブリンanti-D immunoglobulin抗D免疫グロブリン（anti-D immunoglobulin）anti-D immunoglobulin（抗D免疫グロブリン）投与後は、投与された抗D抗体そのものが間接クームス試験indirect Coombs test間接クームス試験（indirect Coombs test）indirect Coombs test（間接クームス試験）を一時的に陽性化させうる。この受動的な陽性を新たな同種免疫alloimmunization同種免疫（alloimmunization）alloimmunization（同種免疫）と混同しない。
• 本試験の結果は投与量を決める一時点の情報であり、その後の妊娠・分娩管理は不規則抗体スクリーニングirregular antibody screening不規則抗体スクリーニング（irregular antibody screening）irregular antibody screening（不規則抗体スクリーニング）と臨床経過で継続して追う。

まとめ

• Kleihauer-Betke試験Kleihauer-Betke testKleihauer-Betke試験（Kleihauer-Betke test）Kleihauer-Betke test（Kleihauer-Betke試験）は、酸溶出法で母体血中の胎児赤血球fetal red blood cell胎児赤血球（fetal red blood cell）fetal red blood cell（胎児赤血球）の割合を数え、胎児母体間出血fetomaternal hemorrhage胎児母体間出血（fetomaternal hemorrhage）fetomaternal hemorrhage（胎児母体間出血）量を推定する検査である。
• 主目的はRhD陰性未感作妊婦unsensitized RhD-negative pregnant womanRhD陰性未感作妊婦（unsensitized RhD-negative pregnant woman）unsensitized RhD-negative pregnant woman（RhD陰性未感作妊婦）における抗D免疫グロブリンanti-D immunoglobulin抗D免疫グロブリン（anti-D immunoglobulin）anti-D immunoglobulin（抗D免疫グロブリン）の追加投与量の算出であり、標準投与量300 µgは胎児全血30 mL（胎児赤血球fetal red blood cell胎児赤血球（fetal red blood cell）fetal red blood cell（胎児赤血球）15 mL）をカバーする。
• 出血の存在を検出する感度は低く、常位胎盤早期剥離placental abruption常位胎盤早期剥離（placental abruption）placental abruption（常位胎盤早期剥離）の確定診断・除外には使えない。
• 母体HbF高値をきたす病態やストレス性の一過性上昇で偽陽性になりうるほか、用手法は観察者間差が大きく、疑わしい症例ではフローサイトメトリーflow cytometryフローサイトメトリー（flow cytometry）flow cytometry（フローサイトメトリー）を追加する。
• 大量出血が疑われる場合や投与量の判断に迷う場合は、時間を空けた再検査を検討する。