直接抗グロブリン試験

🧠 全体像：直接抗グロブリン試験DAT直接抗グロブリン試験（DAT）DAT（直接抗グロブリン試験）は「すでに攻撃を受けている」ことを示す検査である。患者の赤血球そのものを検体にし、表面にすでに結合しているIgGまたは補体C3を検出する——血清中の遊離抗体（まだ結合していない武器）を試薬赤血球で炙り出す間接抗グロブリンantiglobulin (Coombs)抗グロブリン（antiglobulin (Coombs)）antiglobulin (Coombs)（抗グロブリン）試験（IATIllinois Agility TestIAT（Illinois Agility Test）Illinois Agility Test（IAT））とは対照的である。輸血前検査で使うのはIATIllinois Agility TestIAT（Illinois Agility Test）Illinois Agility Test（IAT）であり、DATdirect antiglobulin testDAT（direct antiglobulin test）direct antiglobulin test（DAT）は溶血性貧血の原因検索に使う。抗IgGと抗C3dのどちらが陽性かで溶血性貧血の型が分かれるという一点が、この検査を読むときの軸になる。

何を測っているか

DATdirect antiglobulin testDAT（direct antiglobulin test）direct antiglobulin test（DAT）は患者赤血球を洗浄したうえで、ヒトIgGのFc部分Fc regionFc部分（Fc region）Fc region（Fc部分）および補体成分complement component補体成分（complement component）complement component（補体成分）C3dに結合する抗ヒトグロブリン試薬antihuman globulin reagent抗ヒトグロブリン試薬（antihuman globulin reagent）antihuman globulin reagent（抗ヒトグロブリン試薬）（ポリスペシフィックFickフィック（Fick）Fick（フィック）：抗IgG＋抗C3）を加え、赤血球表面にすでに結合しているIgGまたはC3の有無を凝集の有無で検出する¹。ポリスペシフィックFickフィック（Fick）Fick（フィック）試薬で陽性となった場合、抗IgG単独・抗C3単独のモノスペシフィックFickフィック（Fick）Fick（フィック）試薬で再検し、どちらが陽性かを確認する。

flowchart TD
    A["患者赤血球を採取・洗浄"] --> B["<span class='jp-term jp-term-diagram' title='antihuman globulin reagent'>抗ヒトグロブリン試薬</span>（抗IgG＋抗C3）を添加"]
    B --> C{"凝集の有無"}
    C -->|"陽性"| D["モノスペシ<span class='jp-term jp-term-diagram' title='Fick'>フィック</span>試薬で再検"]
    D --> E["抗IgG単独陽性"]
    D --> F["抗C3単独陽性"]
    D --> G["抗IgG＋抗C3ともに陽性"]
    C -->|"陰性"| H["赤血球表面に抗体・補体の結合なし"]

陽性パターンの読み方——抗IgGか抗C3dか

⭐ 抗IgGと抗C3dのどちらが陽性かで、自己免疫性溶血性貧血autoimmune hemolytic anemia (AIHA)自己免疫性溶血性貧血（autoimmune hemolytic anemia (AIHA)）autoimmune hemolytic anemia (AIHA)（自己免疫性溶血性貧血）の型が分かれる。

温式AIHAwarm-type (antibody) autoimmune hemolytic anemia温式AIHA（warm-type (antibody) autoimmune hemolytic anemia）warm-type (antibody) autoimmune hemolytic anemia（温式AIHA）で抗IgGが陽性となるのとは対照的に、寒冷凝集素症cold agglutinin disease寒冷凝集素症（cold agglutinin disease）cold agglutinin disease（寒冷凝集素症）では抗IgGは陰性〜最大20%で弱陽性にとどまり、抗C3dのみが強陽性になる——この非対称なパターンが両者を鑑別する最も確実な検査所見Laboratory findings検査所見（Laboratory findings）Laboratory findings（検査所見）である²。

直接法と間接法の役割分担

原因不明の溶血性貧血の精査では、DATdirect antiglobulin testDAT（direct antiglobulin test）direct antiglobulin test（DAT）で赤血球表面の抗体・補体の有無を確認し、パターンによって温式AIHAwarm-type (antibody) autoimmune hemolytic anemia温式AIHA（warm-type (antibody) autoimmune hemolytic anemia）warm-type (antibody) autoimmune hemolytic anemia（温式AIHA）・寒冷凝集素症cold agglutinin disease寒冷凝集素症（cold agglutinin disease）cold agglutinin disease（寒冷凝集素症）・薬剤性を振り分ける。遺伝性・後天性溶血性貧血の鑑別では、DATdirect antiglobulin testDAT（direct antiglobulin test）direct antiglobulin test（DAT）陽性なら免疫性溶血、DATdirect antiglobulin testDAT（direct antiglobulin test）direct antiglobulin test（DAT）陰性なら膜異常・酵素異常・PNHへと検索を進める。

測定上の注意

⚠️ DATdirect antiglobulin testDAT（direct antiglobulin test）direct antiglobulin test（DAT）陽性でも溶血が無いことがある。 健常な非入院者コホートでは溶血の証拠を伴わないDATdirect antiglobulin testDAT（direct antiglobulin test）direct antiglobulin test（DAT）陽性が0.1%にとどまるが、入院患者では偽陽性が最大7〜8%に及ぶ¹。DATdirect antiglobulin testDAT（direct antiglobulin test）direct antiglobulin test（DAT）陽性という結果だけで溶血性貧血と診断せず、LDH・間接ビリルビンindirect bilirubin間接ビリルビン（indirect bilirubin）indirect bilirubin（間接ビリルビン）上昇、ハプトグロビンhaptoglobinハプトグロビン（haptoglobin）haptoglobin（ハプトグロビン）低下、網赤血球reticulocyte網赤血球（reticulocyte）reticulocyte（網赤血球）増加など溶血の証拠と併せて解釈する。

• モノスペシフィックFickフィック（Fick）Fick（フィック）試薬による抗IgG・抗C3の区別が、原因の絞り込みに直結する。ポリスペシフィックFickフィック（Fick）Fick（フィック）試薬の陽性だけで型を判定しない。
• DATdirect antiglobulin testDAT（direct antiglobulin test）direct antiglobulin test（DAT）陰性は免疫性溶血を完全には除外しない。低親和性low affinity低親和性（low affinity）low affinity（低親和性）・低力価low-potency低力価（low-potency）low-potency（低力価）の抗体は検出限界limit of detection検出限界（limit of detection）limit of detection（検出限界）を下回ることがある。
• 直近の輸血歴があると、輸血された赤血球由来の反応が結果を複雑にすることがある。

経時変化とモニタリング

DATdirect antiglobulin testDAT（direct antiglobulin test）direct antiglobulin test（DAT）は「今、赤血球表面に抗体・補体が結合しているか」という単回のスナップショットであり、陽性度の強弱だけで治療反応や病勢disease activity (course)病勢（disease activity (course)）disease activity (course)（病勢）を追う検査ではない。治療効果や病勢disease activity (course)病勢（disease activity (course)）disease activity (course)（病勢）の推移は、溶血マーカー（LDH・間接ビリルビンindirect bilirubin間接ビリルビン（indirect bilirubin）indirect bilirubin（間接ビリルビン）・ハプトグロビンhaptoglobinハプトグロビン（haptoglobin）haptoglobin（ハプトグロビン）・網赤血球reticulocyte網赤血球（reticulocyte）reticulocyte（網赤血球））の連続測定で追う。

まとめ

• DATdirect antiglobulin testDAT（direct antiglobulin test）direct antiglobulin test（DAT）は赤血球表面にすでに結合している抗体・補体を検出し、血清中の遊離抗体を検出するIATIllinois Agility TestIAT（Illinois Agility Test）Illinois Agility Test（IAT）とは検体・対象が対照的。輸血前検査に使うのはIATIllinois Agility TestIAT（Illinois Agility Test）Illinois Agility Test（IAT）である。
• ⭐ 抗IgGと抗C3dのどちらが陽性かで型が分かれる——温式AIHAwarm-type (antibody) autoimmune hemolytic anemia温式AIHA（warm-type (antibody) autoimmune hemolytic anemia）warm-type (antibody) autoimmune hemolytic anemia（温式AIHA）は抗IgG陽性、寒冷凝集素症cold agglutinin disease寒冷凝集素症（cold agglutinin disease）cold agglutinin disease（寒冷凝集素症）は抗C3dのみ陽性で抗IgGは陰性（最大20%で弱陽性）。
• 薬剤性溶血もハプテンhaptenハプテン（hapten）hapten（ハプテン）機序（抗IgG陽性）と免疫複合体機序（抗C3陽性）でパターンが分かれる。
• ⚠️ DATdirect antiglobulin testDAT（direct antiglobulin test）direct antiglobulin test（DAT）陽性でも溶血が無いことがある（健常者の一定割合）ため、溶血の証拠（LDH・ハプトグロビンhaptoglobinハプトグロビン（haptoglobin）haptoglobin（ハプトグロビン）・網赤血球reticulocyte網赤血球（reticulocyte）reticulocyte（網赤血球））と併せて解釈する。
• 陽性度そのものは溶血の重症度や治療反応の推移を表さない。モニタリングは溶血マーカーの連続測定で行う。