直接抗グロブリン試験

🧠 全体像：直接抗グロブリン試験 direct antiglobulin test, DAT 直接抗グロブリン試験（direct antiglobulin test, DAT） direct antiglobulin test, DAT（直接抗グロブリン試験） （DAT）は「すでに攻撃を受けている」ことを示す検査である。患者の赤血球そのものを検体にし、表面にすでに結合しているIgGまたは補体C3 complement C3 補体C3（complement C3） complement C3（補体C3） を検出する——血清中の遊離抗体（まだ結合していない武器）を試薬赤血球 reagent red blood cells 試薬赤血球（reagent red blood cells） reagent red blood cells（試薬赤血球） で炙り出す間接抗グロブリン試験 indirect antiglobulin test 間接抗グロブリン試験（indirect antiglobulin test） indirect antiglobulin test（間接抗グロブリン試験） （IAT）とは対照的である。輸血前検査で使うのはIATであり、DATは溶血性貧血の原因検索に使う。抗IgGと抗C3dのどちらが陽性かで溶血性貧血の型が分かれるという一点が、この検査を読むときの軸になる。

何を測っているか

DATは患者赤血球を洗浄したうえで、ヒトIgGのFc部分 Fc region Fc部分（Fc region） Fc region（Fc部分） および補体成分 complement component 補体成分（complement component） complement component（補体成分） C3dに結合する抗ヒトグロブリン試薬 antihuman globulin reagent 抗ヒトグロブリン試薬（antihuman globulin reagent） antihuman globulin reagent（抗ヒトグロブリン試薬） （ポリスペシフィック Fick フィック（Fick） Fick（フィック） ：抗IgG＋抗C3）を加え、赤血球表面にすでに結合しているIgGまたはC3の有無を凝集の有無で検出する¹。ポリスペシフィック試薬polyspecific reagent ポリスペシフィック試薬（polyspecific reagent）polyspecific reagent（ポリスペシフィック試薬） で陽性となった場合、抗IgG単独・抗C3単独のモノスペシフィック試薬 monospecific reagent モノスペシフィック試薬（monospecific reagent） monospecific reagent（モノスペシフィック試薬） で再検し、どちらが陽性かを確認する。

flowchart TD
    A["患者赤血球を採取・洗浄"] --> B["<span class='jp-term jp-term-diagram' title='antihuman globulin reagent'>抗ヒトグロブリン試薬</span>（抗IgG＋抗C3）を添加"]
    B --> C{"凝集の有無"}
    C -->|"陽性"| D["<span class='jp-term jp-term-diagram' title='monospecific reagent'>モノスペシフィック試薬</span>で再検"]
    D --> E["抗IgG単独陽性"]
    D --> F["抗C3単独陽性"]
    D --> G["抗IgG＋抗C3ともに陽性"]
    C -->|"陰性"| H["赤血球表面に抗体・補体の結合なし"]

陽性パターンの読み方——抗IgGか抗C3dか

⭐ 抗IgGと抗C3dのどちらが陽性かで、自己免疫性溶血性貧血autoimmune hemolytic anemia (AIHA) 自己免疫性溶血性貧血（autoimmune hemolytic anemia (AIHA)）autoimmune hemolytic anemia (AIHA)（自己免疫性溶血性貧血） の型が分かれる。

温式AIHAwarm-type (antibody) autoimmune hemolytic anemia 温式AIHA（warm-type (antibody) autoimmune hemolytic anemia）warm-type (antibody) autoimmune hemolytic anemia（温式AIHA） で抗IgGが陽性となるのとは対照的に、寒冷凝集素症cold agglutinin disease 寒冷凝集素症（cold agglutinin disease）cold agglutinin disease（寒冷凝集素症） では抗IgGは陰性〜最大20%で弱陽性にとどまり、抗C3dのみが強陽性になる——この非対称なパターンが両者を鑑別する最も確実な検査所見 Laboratory findings 検査所見（Laboratory findings） Laboratory findings（検査所見） である²。

直接法と間接法の役割分担

原因不明の溶血性貧血の精査では、DATで赤血球表面の抗体・補体の有無を確認し、パターンによって温式AIHA warm-type (antibody) autoimmune hemolytic anemia温式AIHA（warm-type (antibody) autoimmune hemolytic anemia） warm-type (antibody) autoimmune hemolytic anemia（温式AIHA）・寒冷凝集素症cold agglutinin disease寒冷凝集素症（cold agglutinin disease）cold agglutinin disease（寒冷凝集素症）・薬剤性を振り分ける。遺伝性・後天性溶血性貧血hereditary and acquired hemolytic anemias遺伝性・後天性溶血性貧血（hereditary and acquired hemolytic anemias）hereditary and acquired hemolytic anemias（遺伝性・後天性溶血性貧血）の鑑別では、DAT陽性なら免疫性溶血、DAT陰性なら膜異常・酵素異常・PNHへと検索を進める。

測定上の注意

⚠️ DAT陽性でも溶血が無いことがある。 健常な非入院者コホートでは溶血の証拠を伴わないDAT陽性が0.1%にとどまるが、入院患者では偽陽性が最大7〜8%に及ぶ¹。DAT陽性という結果だけで溶血性貧血と診断せず、LDH・間接ビリルビンindirect bilirubin 間接ビリルビン（indirect bilirubin）indirect bilirubin（間接ビリルビン） 上昇、ハプトグロビンhaptoglobin ハプトグロビン（haptoglobin）haptoglobin（ハプトグロビン） 低下、網赤血球reticulocyte網赤血球（reticulocyte）reticulocyte（網赤血球）増加など溶血の証拠と併せて解釈する。

• モノスペシフィック試薬monospecific reagent モノスペシフィック試薬（monospecific reagent）monospecific reagent（モノスペシフィック試薬） による抗IgG・抗C3の区別が、原因の絞り込みに直結する。ポリスペシフィック試薬polyspecific reagent ポリスペシフィック試薬（polyspecific reagent）polyspecific reagent（ポリスペシフィック試薬） の陽性だけで型を判定しない。
• DAT陰性は免疫性溶血を完全には除外しない。低親和性low affinity低親和性（low affinity）low affinity（低親和性）・低力価low-potency 低力価（low-potency）low-potency（低力価） の抗体は検出限界 limit of detection 検出限界（limit of detection） limit of detection（検出限界） を下回ることがある。
• 直近の輸血歴があると、輸血された赤血球由来の反応が結果を複雑にすることがある。

経時変化とモニタリング

DATは「今、赤血球表面に抗体・補体が結合しているか」という単回のスナップショットであり、陽性度の強弱だけで治療反応や病勢 disease activity (course) 病勢（disease activity (course)） disease activity (course)（病勢） を追う検査ではない。治療効果や病勢 disease activity (course) 病勢（disease activity (course)） disease activity (course)（病勢） の推移は、溶血マーカーhemolysis marker 溶血マーカー（hemolysis marker）hemolysis marker（溶血マーカー） （LDH・間接ビリルビンindirect bilirubin間接ビリルビン（indirect bilirubin）indirect bilirubin（間接ビリルビン）・ハプトグロビンhaptoglobinハプトグロビン（haptoglobin）haptoglobin（ハプトグロビン）・網赤血球reticulocyte網赤血球（reticulocyte）reticulocyte（網赤血球））の連続測定で追う。

まとめ

• DATは赤血球表面にすでに結合している抗体・補体を検出し、血清中の遊離抗体を検出するIATとは検体・対象が対照的。輸血前検査に使うのはIATである。
• ⭐ 抗IgGと抗C3dのどちらが陽性かで型が分かれる——温式AIHA warm-type (antibody) autoimmune hemolytic anemia 温式AIHA（warm-type (antibody) autoimmune hemolytic anemia） warm-type (antibody) autoimmune hemolytic anemia（温式AIHA） は抗IgG陽性、寒冷凝集素症cold agglutinin disease 寒冷凝集素症（cold agglutinin disease）cold agglutinin disease（寒冷凝集素症） は抗C3dのみ陽性で抗IgGは陰性（最大20%で弱陽性）。
• 薬剤性溶血もハプテン機序 hapten mechanism ハプテン機序（hapten mechanism） hapten mechanism（ハプテン機序） （抗IgG陽性）と免疫複合体機序 immune complex mechanism 免疫複合体機序（immune complex mechanism） immune complex mechanism（免疫複合体機序） （抗C3陽性）でパターンが分かれる。
• ⚠️ DAT陽性でも溶血が無いことがある（健常者の一定割合）ため、溶血の証拠（LDH・ハプトグロビンhaptoglobinハプトグロビン（haptoglobin）haptoglobin（ハプトグロビン）・網赤血球reticulocyte網赤血球（reticulocyte）reticulocyte（網赤血球））と併せて解釈する。
• 陽性度そのものは溶血の重症度や治療反応の推移を表さない。モニタリングは溶血マーカー hemolysis marker 溶血マーカー（hemolysis marker） hemolysis marker（溶血マーカー） の連続測定で行う。