直接抗グロブリン試験

🧠 全体像：直接抗グロブリン試験 direct antiglobulin test, DAT 直接抗グロブリン試験（direct antiglobulin test, DAT） direct antiglobulin test, DAT（直接抗グロブリン試験） （DATDAT, direct antiglobulin test）は「すでに攻撃を受けている」ことを示す検査である。患者の赤血球そのものを検体にし、表面にすでに結合しているIgGまたは補体C3 complement C3 補体C3（complement C3） complement C3（補体C3） を検出する——血清中の遊離抗体（まだ結合していない武器）を試薬赤血球で炙り出す間接抗グロブリン antiglobulin (Coombs) 抗グロブリン（antiglobulin (Coombs)） antiglobulin (Coombs)（抗グロブリン） 試験（IATIAT, Illinois Agility Test）とは対照的である。輸血前検査で使うのはIATであり、DATは溶血性貧血の原因検索に使う。抗IgGと抗C3dのどちらが陽性かで溶血性貧血の型が分かれるという一点が、この検査を読むときの軸になる。

何を測っているか

DATは患者赤血球を洗浄したうえで、ヒトIgGのFc部分 Fc region Fc部分（Fc region） Fc region（Fc部分） および補体成分 complement component 補体成分（complement component） complement component（補体成分） C3dに結合する抗ヒトグロブリン試薬 antihuman globulin reagent 抗ヒトグロブリン試薬（antihuman globulin reagent） antihuman globulin reagent（抗ヒトグロブリン試薬） （ポリスペシフィック Fick フィック（Fick） Fick（フィック） ：抗IgG＋抗C3）を加え、赤血球表面にすでに結合しているIgGまたはC3の有無を凝集の有無で検出する¹。ポリスペシフィック Fick フィック（Fick） Fick（フィック） 試薬で陽性となった場合、抗IgG単独・抗C3単独のモノスペシフィック Fick フィック（Fick） Fick（フィック） 試薬で再検し、どちらが陽性かを確認する。

flowchart TD
    A["患者赤血球を採取・洗浄"] --> B["<span class='jp-term jp-term-diagram' title='antihuman globulin reagent'>抗ヒトグロブリン試薬</span>（抗IgG＋抗C3）を添加"]
    B --> C{"凝集の有無"}
    C -->|"陽性"| D["モノスペシ<span class='jp-term jp-term-diagram' title='Fick'>フィック</span>試薬で再検"]
    D --> E["抗IgG単独陽性"]
    D --> F["抗C3単独陽性"]
    D --> G["抗IgG＋抗C3ともに陽性"]
    C -->|"陰性"| H["赤血球表面に抗体・補体の結合なし"]

陽性パターンの読み方——抗IgGか抗C3dか

⭐ 抗IgGと抗C3dのどちらが陽性かで、自己免疫性溶血性貧血autoimmune hemolytic anemia (AIHA) 自己免疫性溶血性貧血（autoimmune hemolytic anemia (AIHA)）autoimmune hemolytic anemia (AIHA)（自己免疫性溶血性貧血） の型が分かれる。

温式AIHAwarm-type (antibody) autoimmune hemolytic anemia 温式AIHA（warm-type (antibody) autoimmune hemolytic anemia）warm-type (antibody) autoimmune hemolytic anemia（温式AIHA） で抗IgGが陽性となるのとは対照的に、寒冷凝集素症cold agglutinin disease 寒冷凝集素症（cold agglutinin disease）cold agglutinin disease（寒冷凝集素症） では抗IgGは陰性〜最大20%で弱陽性にとどまり、抗C3dのみが強陽性になる——この非対称なパターンが両者を鑑別する最も確実な検査所見 Laboratory findings 検査所見（Laboratory findings） Laboratory findings（検査所見） である²。

直接法と間接法の役割分担

原因不明の溶血性貧血の精査では、DATで赤血球表面の抗体・補体の有無を確認し、パターンによって温式AIHA warm-type (antibody) autoimmune hemolytic anemia温式AIHA（warm-type (antibody) autoimmune hemolytic anemia） warm-type (antibody) autoimmune hemolytic anemia（温式AIHA）・寒冷凝集素症cold agglutinin disease寒冷凝集素症（cold agglutinin disease）cold agglutinin disease（寒冷凝集素症）・薬剤性を振り分ける。遺伝性・後天性溶血性貧血の鑑別では、DAT陽性なら免疫性溶血、DAT陰性なら膜異常・酵素異常・PNHへと検索を進める。

測定上の注意

⚠️ DAT陽性でも溶血が無いことがある。 健常な非入院者コホートでは溶血の証拠を伴わないDAT陽性が0.1%にとどまるが、入院患者では偽陽性が最大7〜8%に及ぶ¹。DAT陽性という結果だけで溶血性貧血と診断せず、LDH・間接ビリルビンindirect bilirubin 間接ビリルビン（indirect bilirubin）indirect bilirubin（間接ビリルビン） 上昇、ハプトグロビンhaptoglobin ハプトグロビン（haptoglobin）haptoglobin（ハプトグロビン） 低下、網赤血球reticulocyte網赤血球（reticulocyte）reticulocyte（網赤血球）増加など溶血の証拠と併せて解釈する。

• モノスペシフィック Fick フィック（Fick） Fick（フィック） 試薬による抗IgG・抗C3の区別が、原因の絞り込みに直結する。ポリスペシフィック Fick フィック（Fick） Fick（フィック） 試薬の陽性だけで型を判定しない。
• DAT陰性は免疫性溶血を完全には除外しない。低親和性low affinity低親和性（low affinity）low affinity（低親和性）・低力価low-potency 低力価（low-potency）low-potency（低力価） の抗体は検出限界 limit of detection 検出限界（limit of detection） limit of detection（検出限界） を下回ることがある。
• 直近の輸血歴があると、輸血された赤血球由来の反応が結果を複雑にすることがある。

経時変化とモニタリング

DATは「今、赤血球表面に抗体・補体が結合しているか」という単回のスナップショットであり、陽性度の強弱だけで治療反応や病勢 disease activity (course) 病勢（disease activity (course)） disease activity (course)（病勢） を追う検査ではない。治療効果や病勢 disease activity (course) 病勢（disease activity (course)） disease activity (course)（病勢） の推移は、溶血マーカー（LDHLDH（lactate dehydrogenase）・間接ビリルビンindirect bilirubin間接ビリルビン（indirect bilirubin）indirect bilirubin（間接ビリルビン）・ハプトグロビンhaptoglobinハプトグロビン（haptoglobin）haptoglobin（ハプトグロビン）・網赤血球reticulocyte網赤血球（reticulocyte）reticulocyte（網赤血球））の連続測定で追う。

まとめ

• DATは赤血球表面にすでに結合している抗体・補体を検出し、血清中の遊離抗体を検出するIATとは検体・対象が対照的。輸血前検査に使うのはIATである。
• ⭐ 抗IgGと抗C3dのどちらが陽性かで型が分かれる——温式AIHA warm-type (antibody) autoimmune hemolytic anemia 温式AIHA（warm-type (antibody) autoimmune hemolytic anemia） warm-type (antibody) autoimmune hemolytic anemia（温式AIHA） は抗IgG陽性、寒冷凝集素症cold agglutinin disease 寒冷凝集素症（cold agglutinin disease）cold agglutinin disease（寒冷凝集素症） は抗C3dのみ陽性で抗IgGは陰性（最大20%で弱陽性）。
• 薬剤性溶血もハプテン hapten ハプテン（hapten） hapten（ハプテン） 機序（抗IgG陽性）と免疫複合体機序（抗C3陽性）でパターンが分かれる。
• ⚠️ DAT陽性でも溶血が無いことがある（健常者の一定割合）ため、溶血の証拠（LDH・ハプトグロビンhaptoglobinハプトグロビン（haptoglobin）haptoglobin（ハプトグロビン）・網赤血球reticulocyte網赤血球（reticulocyte）reticulocyte（網赤血球））と併せて解釈する。
• 陽性度そのものは溶血の重症度や治療反応の推移を表さない。モニタリングは溶血マーカーの連続測定で行う。