KOH標本

🧠 全体像：KOH標本KOH preparationKOH標本（KOH preparation）KOH preparation（KOH標本）（水酸化カリウム直接鏡検KOH preparation水酸化カリウム直接鏡検（KOH preparation）KOH preparation（水酸化カリウム直接鏡検））は、角質・爪・毛・鱗屑や腟分泌物vaginal discharge腟分泌物（vaginal discharge）vaginal discharge（腟分泌物）のケラチンkeratinケラチン（keratin）keratin（ケラチン）と細胞成分をアルカリで溶かし、溶けずに残る真菌の菌糸・胞子だけを浮かび上がらせる検体処理である。この検査で分かるのは「菌がいるか」であって「何という菌か」ではない——菌種の同定には培養や分子生物学的検査molecular methods分子生物学的検査（molecular methods）molecular methods（分子生物学的検査）が要る。皮膚科dermatologic皮膚科（dermatologic）dermatologic（皮膚科）領域では皮膚糸状菌症dermatophytosis皮膚糸状菌症（dermatophytosis）dermatophytosis（皮膚糸状菌症）・カンジダ症・癜風pityriasis versicolor (tinea versicolor)癜風（pityriasis versicolor (tinea versicolor)）pityriasis versicolor (tinea versicolor)（癜風）の鏡検に、婦人科領域ではwhiff試験whiff testwhiff試験（whiff test）whiff test（whiff試験）と同じ標本から外陰腟カンジダ症vulvovaginal candidiasis, VVC外陰腟カンジダ症（vulvovaginal candidiasis, VVC）vulvovaginal candidiasis, VVC（外陰腟カンジダ症）の酵母・仮性菌糸pseudohypha仮性菌糸（pseudohypha）pseudohypha（仮性菌糸）を確認するのに使われる——「腟の3標本」と「皮膚科dermatologic皮膚科（dermatologic）dermatologic（皮膚科）の真菌鏡検」という2つの文脈にまたがる検体処理であり、このノートは標本操作の側からその両方を束ねる。

何をしているか

KOHは強塩基strong base強塩基（strong base）strong base（強塩基）で、ケラチンkeratinケラチン（keratin）keratin（ケラチン）を架橋しているジスルフィド結合disulfide bondジスルフィド結合（disulfide bond）disulfide bond（ジスルフィド結合）を切断して角質・爪・毛を清明化clearing清明化（clearing）clearing（清明化）する。真菌の細胞壁はケラチンkeratinケラチン（keratin）keratin（ケラチン）ではなくキチン・グルカンglucanグルカン（glucan）glucan（グルカン）でできておりアルカリに抵抗するため、周囲の宿主組織が溶けたあとも菌糸・胞子だけが壊れずに残る。皮膚科dermatologic皮膚科（dermatologic）dermatologic（皮膚科）領域の検体には10〜30%のKOH溶液potassium hydroxide solutionKOH溶液（potassium hydroxide solution）potassium hydroxide solution（KOH溶液）を用いる¹。腟分泌物vaginal discharge腟分泌物（vaginal discharge）vaginal discharge（腟分泌物）ではwhiff試験whiff testwhiff試験（whiff test）whiff test（whiff試験）と共通の10% KOHを用いる。

補助的な処理・染色を併用すると清明化clearing清明化（clearing）clearing（清明化）や観察がしやすくなる。

検体の採り方

検体の採り方が結果を左右する。

• 鱗屑は病変の辺縁（活動部）から掻き取る。体部白癬tinea corporis体部白癬（tinea corporis）tinea corporis（体部白癬）では辺縁の環状部、足白癬tinea pedis足白癬（tinea pedis）tinea pedis（足白癬）では水疱蓋blister roof水疱蓋（blister roof）blister roof（水疱蓋）から集める——中心部は治癒傾向にあり菌量が少ない¹。
• 爪では爪甲nail plate爪甲（nail plate）nail plate（爪甲）下の角質、爪床nail bed爪床（nail bed）nail bed（爪床）に近い深部を検査材料とする。爪切りで剥離部位・先端部を除去したうえで採取し、混濁opacity (turbidity)混濁（opacity (turbidity)）opacity (turbidity)（混濁）した辺縁部からの採取は培養陽性率も上げる¹。
• ⚠️ 抗真菌薬を先行使用していると偽陰性になりうる。 外用・内服いずれも菌要素を減少・変性させるため、可能なら検査前に休薬期間hormone-free interval (drug-free interval)休薬期間（hormone-free interval (drug-free interval)）hormone-free interval (drug-free interval)（休薬期間）をおくことが望ましい。

陽性所見の読み分け

観察される菌要素の形態で原因菌を絞り込める——ただし菌種の同定ではなく推定にとどまる。皮膚糸状菌症dermatophytosis皮膚糸状菌症（dermatophytosis）dermatophytosis（皮膚糸状菌症）では隔壁のある分枝菌糸septate branching hyphae隔壁のある分枝菌糸（septate branching hyphae）septate branching hyphae（隔壁のある分枝菌糸）、カンジダ症では出芽酵母budding yeasts出芽酵母（budding yeasts）budding yeasts（出芽酵母）と仮性菌糸pseudohypha仮性菌糸（pseudohypha）pseudohypha（仮性菌糸）（ブドウの房状・桑実状に集簇aggregation/clustering (histological, e.g. lymphocytic aggregates)集簇（aggregation/clustering (histological, e.g. lymphocytic aggregates)）aggregation/clustering (histological, e.g. lymphocytic aggregates)（集簇）した胞子を伴うことがある）、癜風pityriasis versicolor (tinea versicolor)癜風（pityriasis versicolor (tinea versicolor)）pityriasis versicolor (tinea versicolor)（癜風）では太く短い菌糸と球状spherical球状（spherical）spherical（球状）の胞子が集簇aggregation/clustering (histological, e.g. lymphocytic aggregates)集簇（aggregation/clustering (histological, e.g. lymphocytic aggregates)）aggregation/clustering (histological, e.g. lymphocytic aggregates)（集簇）した像（比喩的に「スパゲッティとミートボールspaghetti and meatballsミートボール（spaghetti and meatballs）spaghetti and meatballs（ミートボール）」像と呼ばれる）が観察される¹。

⚠️ 偽陽性の原因になるアーチファクトartifactアーチファクト（artifact）artifact（アーチファクト）がある。 角質細胞corneocyte角質細胞（corneocyte）corneocyte（角質細胞）間の脂肪滴が菌糸に見える「菌様モザイクmosaic fungus artifact菌様モザイク（mosaic fungus artifact）mosaic fungus artifact（菌様モザイク）」、綿などの繊維、真皮の膠原線維collagen fiber膠原線維（collagen fiber）collagen fiber（膠原線維）、細胞境界が、菌糸や胞子と紛らわしい¹。観察に習熟していないと取り違える。

腟の文脈：同じ検体からの3つの標本

細菌性腟症bacterial vaginosis, BV細菌性腟症（bacterial vaginosis, BV）bacterial vaginosis, BV（細菌性腟症）をAmsel基準Amsel criteriaAmsel基準（Amsel criteria）Amsel criteria（Amsel基準）で評価するとき、腟分泌物vaginal discharge腟分泌物（vaginal discharge）vaginal discharge（腟分泌物）から目的ごとに別の標本を作る。KOH標本KOH preparationKOH標本（KOH preparation）KOH preparation（KOH標本）はそのうちの1つにすぎない。

whiff試験whiff testwhiff試験（whiff test）whiff test（whiff試験）の判定後、カバーガラスcover glassカバーガラス（cover glass）cover glass（カバーガラス）をかけて5分静置すると上皮細胞・赤血球が溶解し、他の細胞に妨げられずに酵母の仮性菌糸pseudohypha仮性菌糸（pseudohypha）pseudohypha（仮性菌糸）・分芽胞子blastospore/blastoconidia分芽胞子（blastospore/blastoconidia）blastospore/blastoconidia（分芽胞子）を鏡検できる——1つのKOH標本KOH preparationKOH標本（KOH preparation）KOH preparation（KOH標本）からwhiff試験whiff testwhiff試験（whiff test）whiff test（whiff試験）と真菌の確認という2つの情報が得られる²。一方clue cellの判定はKOHを使わない生理食塩水湿式標本saline wet mount生理食塩水湿式標本（saline wet mount）saline wet mount（生理食塩水湿式標本）で行う別の操作であり、KOH標本KOH preparationKOH標本（KOH preparation）KOH preparation（KOH標本）にも生理食塩水saline生理食塩水（saline）saline（生理食塩水）標本にもそれぞれ別のスライドslideスライド（slide）slide（スライド）を用いる²。

⚠️ 測定上の注意

• 陰性でも真菌症を否定できない。 頭部白癬tinea capitis頭部白癬（tinea capitis）tinea capitis（頭部白癬）では直接鏡検direct microscopic examination直接鏡検（direct microscopic examination）direct microscopic examination（直接鏡検）の感度が高いとはいえず偽陰性になりやすいとされ、臨床的に強く疑うなら培養へ進む¹。爪白癬tinea unguium爪白癬（tinea unguium）tinea unguium（爪白癬）でも伝統的Traditional伝統的（Traditional）Traditional（伝統的）なKOH湿式標本wet mount (preparation)湿式標本（wet mount (preparation)）wet mount (preparation)（湿式標本）の感度は約60%にとどまり、菌種の同定はできない³。
• 判定は術者operator (person performing the procedure)術者（operator (person performing the procedure)）operator (person performing the procedure)（術者）の熟練度に大きく依存する。 判定の信頼性reliability信頼性（reliability）reliability（信頼性）は施行医の技量に左右されるとされ、頭部白癬tinea capitis頭部白癬（tinea capitis）tinea capitis（頭部白癬）では培養（感度51〜97%）のほうが直接鏡検direct microscopic examination直接鏡検（direct microscopic examination）direct microscopic examination（直接鏡検）（感度59〜73%）より感度が高いとされる⁴。

経時変化とモニタリング

KOH標本KOH preparationKOH標本（KOH preparation）KOH preparation（KOH標本）は基本的に単回の診断用所見だが、治療効果判定には直接鏡検direct microscopic examination直接鏡検（direct microscopic examination）direct microscopic examination（直接鏡検）陰性かつ培養陰性をもって「真菌学的治癒mycological cure真菌学的治癒（mycological cure）mycological cure（真菌学的治癒）」とする用い方もある¹。ただし見た目の改善（色調・鱗屑の消失）と菌学的治癒の間には時間差があり、鏡検陰性だけを理由に治療を打ち切ってよいとは限らない。

まとめ

• KOH標本KOH preparationKOH標本（KOH preparation）KOH preparation（KOH標本）は角質・爪・毛や腟分泌物vaginal discharge腟分泌物（vaginal discharge）vaginal discharge（腟分泌物）のケラチンkeratinケラチン（keratin）keratin（ケラチン）をアルカリで溶かし、アルカリに抵抗する真菌の菌糸・胞子だけを残す検体処理である。菌の存在は分かるが菌種の同定はできない。
• 加温・DMSO・クロラゾールブラックE・カルコフルオロホワイト（蛍光顕微鏡fluorescence microscope蛍光顕微鏡（fluorescence microscope）fluorescence microscope（蛍光顕微鏡）が要る）などを併用すると観察しやすくなる。
• 検体は病変の辺縁（活動部）、爪では爪床nail bed爪床（nail bed）nail bed（爪床）に近い深部から採る。抗真菌薬の先行使用は偽陰性の原因になる。
• 隔壁のある分枝菌糸septate branching hyphae隔壁のある分枝菌糸（septate branching hyphae）septate branching hyphae（隔壁のある分枝菌糸）は皮膚糸状菌症dermatophytosis皮膚糸状菌症（dermatophytosis）dermatophytosis（皮膚糸状菌症）、出芽酵母budding yeasts出芽酵母（budding yeasts）budding yeasts（出芽酵母）＋仮性菌糸pseudohypha仮性菌糸（pseudohypha）pseudohypha（仮性菌糸）はカンジダ症、太く短い菌糸＋球状spherical球状（spherical）spherical（球状）胞子の集簇aggregation/clustering (histological, e.g. lymphocytic aggregates)集簇（aggregation/clustering (histological, e.g. lymphocytic aggregates)）aggregation/clustering (histological, e.g. lymphocytic aggregates)（集簇）（「スパゲッティとミートボールspaghetti and meatballsミートボール（spaghetti and meatballs）spaghetti and meatballs（ミートボール）」像）は癜風pityriasis versicolor (tinea versicolor)癜風（pityriasis versicolor (tinea versicolor)）pityriasis versicolor (tinea versicolor)（癜風）を示唆する。角質細胞corneocyte角質細胞（corneocyte）corneocyte（角質細胞）間の脂肪滴による「菌様モザイクmosaic fungus artifact菌様モザイク（mosaic fungus artifact）mosaic fungus artifact（菌様モザイク）」、綿などの繊維、真皮の膠原線維collagen fiber膠原線維（collagen fiber）collagen fiber（膠原線維）は菌糸と紛らわしい混入物になる。
• 腟の3標本のうち、whiff試験whiff testwhiff試験（whiff test）whiff test（whiff試験）と外陰腟カンジダ症vulvovaginal candidiasis, VVC外陰腟カンジダ症（vulvovaginal candidiasis, VVC）vulvovaginal candidiasis, VVC（外陰腟カンジダ症）の確認は同じ10% KOH標本KOH preparationKOH標本（KOH preparation）KOH preparation（KOH標本）で行い、clue cellの判定は別の生理食塩水湿式標本saline wet mount生理食塩水湿式標本（saline wet mount）saline wet mount（生理食塩水湿式標本）で行う。
• 陰性でも真菌症を否定できず、判定は術者operator (person performing the procedure)術者（operator (person performing the procedure)）operator (person performing the procedure)（術者）の熟練度に大きく依存する。